大肠菌群的检测方法

大肠菌群的检测方法

标准

GB/T 4789.3-2003 食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定

GB 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数

GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法 微生物指标

附送一个:18204.4 公共用品用具微生物(这是公共场所的标准,其实可以用来做生产车间的用具和手部的检测方法)

GB/T 4789.3-2003 大肠菌群测定

03版只有一个方法:MPN法,也有人叫九管法。

阳性的方法步骤:

制样→接种到乳糖胆盐发酵管→伊红美蓝培养基→乳糖发酵管(同时做革兰氏染色)→看表计算。

其实这个方法比较简单的一个方法,也是常说的半定量的方法。

GB/T 4789.3-2003 大肠菌群测定注意事项

我们下面说一下这个方法的注意事项。

第一,这个方法是一个半定量的方法,最不好要用于测量审核上。

第二,做实验前要注意导管里是否有空气(最好使用大直径的小导管),以免影响结果的判断,增加工作量。

第三,经常有人会无视标准有一个粪大肠的检测步骤。这个很少人会去做。

第四,对伊红美蓝的阳性现象不了解(其实实验室可以在做出阳性结果之后,将菌接出来,以后用来做人员培训)。

第五,对标准是否还在实行不清楚,很多人在16版出来的时候,都在问03版是不是也作废了,其实并没有。03版目前还在执行着(毕竟还有些标准还在用着它的单位)。

GB 4789.3-2016 大肠菌群计数

这个标准里有两个方法:MPN法和平板计算。

首先说MPN法,它相对于03版的MPN有一定的区别。第一两个方法用的培养基完全不一样。第二16版的方法没有伊红美蓝画线,这样的过程减少了一步相对简单一点。第三单位变了。

平板法:其实平板是我们目前用得最多的一个方法,步骤看标准的实验流程图。

那么平板法有什么注意的呢?

第一,做平板法的时候需要覆盖第二层培养基,它的作用是:有助于典型菌落形成也为了防止蔓延性细菌生长。

第二,挑菌,其实这一步主要怕挑菌的时候挑不到菌,其实你可以把带菌的部分培养基完全挑起来(不要怕培养基包含着他出不来)放到BGLB内,然后用手腕力摇一下试管就可以把培养基打碎。

第三,计算问题,标准挑取10个典型菌落。然后计算比例再乘以所有典型菌落的数(有人会在这里纠结,觉得不太准确,应该所有菌落都挑取)其实这个一个想法很好,但是这样之后增加工作量的同时影响效率。其实在平板上你应该区分典型菌落出来去做就可以(当然这步要考验一个人的眼力和经验)初学者可以根据形态进行分类,然后以形态特征进行验证。

两个版本的一些检测方法和注意事项都说了,那么我们说一下一些朋友常问的一些问题。

1、如何选择检测方法?

答:你要根据产品的执行标准去选择检测方法,不是说你喜欢那种就可以用那种。

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