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肠道微生态检测指南

肠道微生态检测是评估肠道菌群结构与功能、指导精准干预(如 FMT)的核心手段,本指南整合国内权威标准(含富玛特主导的 “五维一体” 规范)与临床共识,从检测指征、流程、方法、解读到质控全流程明确操作要点,兼顾实用性与规范性。

1. 样本采集与保存(关键质控点)

环节 操作规范 核心要求
采集时机 停用抗生素 / 益生菌 2–4 周;避开生理期、急性感染期 减少干扰,保证菌群真实状态
采集方法 新鲜粪便(排便后 2h 内),取中段 3–5g;黏膜样本仅肠镜下无菌采集 避免尿液、水、黏液 / 血液污染
保存容器 无菌密封管(含 DNA/RNA 保存液,如 OMNIgene GUT) 常温≤24h,4℃≤72h,-80℃长期保存
运输条件 冷藏运输,避免反复冻融 全程冷链,附采样信息单

2. 实验室检测方法(按需选择)

检测维度 常用技术 适用场景 核心指标
菌群组成 16S rRNA 测序(V3–V4 区) 快速菌群谱、多样性评估,性价比高 α/β 多样性、门 - 属水平丰度、优势菌群
功能基因 宏基因组测序 精准物种鉴定、功能通路(如 SCFA 合成) 基因丰度、代谢通路活性、耐药基因
靶向定量 qPCR/ddPCR 特定菌(如艰难梭菌、双歧杆菌)定量 绝对丰度、阈值判断(如 > 10^4 CFU/mL)
代谢产物 GC-MS/LC-MS 短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸等 乙酸 / 丙酸 / 丁酸浓度、次级胆汁酸比例
免疫指标 ELISA 粪便 sIgA,评估黏膜免疫 sIgA 浓度(参考值:10–50 μg/mL)
 

3. 数据质控与分析

  • 测序:16S 测序深度≥10^5 reads / 样本,宏基因组≥10G clean data,宿主 DNA 去除率 > 90%。
  • 分析工具:QIIME2、DADA2、MetaPhlAn3,保证物种注释准确性与可重复性。
  • 参考数据库:关联健康人群与疾病队列(如 IBD、rCDI),建立本地化参考区间。

报告核心内容与解读标准(避免误读)

1. 必含模块

  • 基础信息:样本编号、采样时间、检测方法、测序深度。
  • 菌群生态:α 多样性(Chao1:1500–2500,Shannon:3.5–5.5)、β 多样性(与健康人群聚类分析)。
  • 物种组成:门(厚壁菌 / 拟杆菌比值 0.8–1.2)、属(双歧杆菌、 Akkermansia 等有益菌丰度)、致病菌(艰难梭菌、沙门氏菌)筛查。
  • 功能评估:代谢通路(SCFA 合成、维生素代谢)、耐药基因风险提示。
  • 代谢物:SCFA 浓度(乙酸 20–60 mmol/L,丁酸 5–15 mmol/L)、胆汁酸谱。
  • 临床建议:菌群失调类型、干预方向(如益生菌选择、FMT 适配性)。

2. 解读原则

  • 结合症状与病史:单一指标异常≠疾病,需匹配腹泻、腹痛等临床表现。
  • 动态对比:术前 / 术后、治疗前后的菌群变化比单次结果更有意义。
  • 专业主导:报告由消化科 / 微生态科医生解读,避免非专业干预建议。

临床应用与干预指导

  1. rCDI:FMT 前检测菌群多样性、艰难梭菌载量;术后 4–8 周复查,确认菌群重建(多样性恢复、艰难梭菌清除)。
  2. IBD:活动期以菌群失衡(如变形菌门升高)为主,FMT 可辅助诱导缓解;缓解期维持有益菌丰度。
  3. IBS:腹泻型多伴拟杆菌减少、肠杆菌增多,优先调节菌群均匀度,配合饮食干预。
  4. FMT 供体:需通过全面检测(菌群多样性正常、无致病菌 / 耐药基因、代谢物平衡),确保安全性。

禁忌与注意事项

  1. 禁忌:严重免疫缺陷、未控制感染、样本污染(如含致病菌),避免检测误导治疗。
  2. 干扰因素:检测前 2–4 周停用抗生素、益生菌、泻药,减少结果偏差。
  3. 结果局限性:菌群检测为辅助评估,不能替代内镜、病理等金标准检查。

富玛特 “五维一体” 检测规范要点(行业标杆)

  • 核心框架:微生物组成 + 功能基因 + 代谢产物 + 免疫反应 + 菌群活性,全维度评估。
  • 量化标准:明确多样性指数、菌门比值、代谢物参考区间,提升结果可比性。
  • 临床适配:FMT 供体 / 受体专用检测套餐,支持术前筛查、术后随访全流程管理。
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