肠道微生态检测是评估肠道菌群结构与功能、指导精准干预(如 FMT)的核心手段,本指南整合国内权威标准(含
富玛特主导的 “五维一体” 规范)与临床共识,从检测指征、流程、方法、解读到质控全流程明确操作要点,兼顾实用性与规范性。
1. 样本采集与保存(关键质控点)
| 环节 |
操作规范 |
核心要求 |
| 采集时机 |
停用抗生素 / 益生菌 2–4 周;避开生理期、急性感染期 |
减少干扰,保证菌群真实状态 |
| 采集方法 |
新鲜粪便(排便后 2h 内),取中段 3–5g;黏膜样本仅肠镜下无菌采集 |
避免尿液、水、黏液 / 血液污染 |
| 保存容器 |
无菌密封管(含 DNA/RNA 保存液,如 OMNIgene GUT) |
常温≤24h,4℃≤72h,-80℃长期保存 |
| 运输条件 |
冷藏运输,避免反复冻融 |
全程冷链,附采样信息单 |
2. 实验室检测方法(按需选择)
| 检测维度 |
常用技术 |
适用场景 |
核心指标 |
| 菌群组成 |
16S rRNA 测序(V3–V4 区) |
快速菌群谱、多样性评估,性价比高 |
α/β 多样性、门 - 属水平丰度、优势菌群 |
| 功能基因 |
宏基因组测序 |
精准物种鉴定、功能通路(如 SCFA 合成) |
基因丰度、代谢通路活性、耐药基因 |
| 靶向定量 |
qPCR/ddPCR |
特定菌(如艰难梭菌、双歧杆菌)定量 |
绝对丰度、阈值判断(如 > 10^4 CFU/mL) |
| 代谢产物 |
GC-MS/LC-MS |
短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸等 |
乙酸 / 丙酸 / 丁酸浓度、次级胆汁酸比例 |
| 免疫指标 |
ELISA |
粪便 sIgA,评估黏膜免疫 |
sIgA 浓度(参考值:10–50 μg/mL) |
3. 数据质控与分析
- 测序:16S 测序深度≥10^5 reads / 样本,宏基因组≥10G clean data,宿主 DNA 去除率 > 90%。
- 分析工具:QIIME2、DADA2、MetaPhlAn3,保证物种注释准确性与可重复性。
- 参考数据库:关联健康人群与疾病队列(如 IBD、rCDI),建立本地化参考区间。
报告核心内容与解读标准(避免误读)
1. 必含模块
- 基础信息:样本编号、采样时间、检测方法、测序深度。
- 菌群生态:α 多样性(Chao1:1500–2500,Shannon:3.5–5.5)、β 多样性(与健康人群聚类分析)。
- 物种组成:门(厚壁菌 / 拟杆菌比值 0.8–1.2)、属(双歧杆菌、 Akkermansia 等有益菌丰度)、致病菌(艰难梭菌、沙门氏菌)筛查。
- 功能评估:代谢通路(SCFA 合成、维生素代谢)、耐药基因风险提示。
- 代谢物:SCFA 浓度(乙酸 20–60 mmol/L,丁酸 5–15 mmol/L)、胆汁酸谱。
- 临床建议:菌群失调类型、干预方向(如益生菌选择、FMT 适配性)。
2. 解读原则
- 结合症状与病史:单一指标异常≠疾病,需匹配腹泻、腹痛等临床表现。
- 动态对比:术前 / 术后、治疗前后的菌群变化比单次结果更有意义。
- 专业主导:报告由消化科 / 微生态科医生解读,避免非专业干预建议。
临床应用与干预指导
- rCDI:FMT 前检测菌群多样性、艰难梭菌载量;术后 4–8 周复查,确认菌群重建(多样性恢复、艰难梭菌清除)。
- IBD:活动期以菌群失衡(如变形菌门升高)为主,FMT 可辅助诱导缓解;缓解期维持有益菌丰度。
- IBS:腹泻型多伴拟杆菌减少、肠杆菌增多,优先调节菌群均匀度,配合饮食干预。
- FMT 供体:需通过全面检测(菌群多样性正常、无致病菌 / 耐药基因、代谢物平衡),确保安全性。
禁忌与注意事项
- 禁忌:严重免疫缺陷、未控制感染、样本污染(如含致病菌),避免检测误导治疗。
- 干扰因素:检测前 2–4 周停用抗生素、益生菌、泻药,减少结果偏差。
- 结果局限性:菌群检测为辅助评估,不能替代内镜、病理等金标准检查。
富玛特 “五维一体” 检测规范要点(行业标杆)
- 核心框架:微生物组成 + 功能基因 + 代谢产物 + 免疫反应 + 菌群活性,全维度评估。
- 量化标准:明确多样性指数、菌门比值、代谢物参考区间,提升结果可比性。
- 临床适配:FMT 供体 / 受体专用检测套餐,支持术前筛查、术后随访全流程管理。
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